Crioconservación seminal en peces de agua dulce: aspectos biotecnológicos, celulares y bioquímicos / Seminal Cryopreservation in Freshwater Fish: Biotechnological, Cellular and Biochemical Aspects / Criopreservação Seminal em Peixes de Água Doce: Aspectos Biotecnológicos, Celulares e Bioquímicos

Resumen La crioconservación es una herramienta biotecnológica que en peces está orientada principalmente a la conservación criogénica de semen como estrategia de preservación del recurso genético y a su uso para la producción de alevinos con fines diferentes. Actualmente, los protocolos de crioconservación seminal en peces de agua dulce establecen una amplia variedad de procedimientos cuya efectividad se basa en aspectos ligados a la calidad seminal post-descongelación y la fertilidad, así como su relación con el desarrollo de la progenie. El efecto de la conservación del semen en nitrógeno líquido por periodos amplios de tiempo también toma importancia en ésta biotecnología. Por lo anterior, el objetivo de la presente revisión es describir aspectos biotecnológicos, celulares y bioquímicos asociados al proceso de crioconservación seminal en peces dulceacuícolas, resaltando los avances, las limitaciones y sus perspectivas.

Abstract Cryopreservation is a biotechnological tool that in fish is mainly aimed at cryogenic conservation of semen as a strategy for preserving the genetic resource and its use for the production of fingerlings with different purposes. Currently, seminal cryopreservation protocols in freshwater fish establish a wide variety of procedures whose effectiveness is based on aspects linked to seminal post-thaw quality and fertility, as well as its relationship with the development of the progeny. The effect of preserving semen in liquid nitrogen for extended periods of time also plays an important role in this biotechnology. Therefore, the objective of this review is to describe biotechnological, cellular and biochemical aspects associated with the seminal cryopreservation process in freshwater fish, highlighting the advances, limitations and perspectives.

Resumo A criopreservação é uma ferramenta biotecnológica que em peixes visa principalmente a conservação criogênica do sêmen como estratégia para a preservação do recurso genético e sua utilização para a produção de alevinos para diferentes fins. Atualmente, os protocolos de criopreservação seminal em peixes de água doce estabelecem uma ampla variedade de procedimentos cuja eficácia se baseia em aspectos relacionados à qualidade e fertilidade pós-descongelamento seminal, bem como sua relação com o desenvolvimento da progênie. O efeito da preservação do sêmen no nitrogênio líquido por longos períodos de tempo também desempenha um papel importante nessa biotecnologia. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever aspectos biotecnológicos, celulares e bioquímicos associados ao processo de criopreservação seminal em peixes de água doce, destacando os avanços, limitações e perspectivas.

Crioconservación seminal de Colossoma macropomum como estrategia de producción y conservación en la Orinoquia Colombiana / Seminal cryopreservation of Colossoma macropomum as a production and conservation strategy in the Colombian Orinoquia / Criopreservação seminal de Colossoma macropomum como estratégia de produção e conservação na Orinoquia Colombiana

Resumen La Cachama negra (Colossoma macropomum) es un pez nativo de Sur América. En Colombia, no hay estudios publicados sobre protocolos estandarizados para su crioconservación seminal. La implementación de esta biotecnología permitiría su producción comercial continua e introducción en bancos de recursos genéticos. El objetivo del presente estudio fue evaluar los efectos de la crioconservación sobre el semen de C. macropomum sometido a diferentes crioprotectores y sistemas de empaque con miras a consolidar un protocolo eficiente para la especie. Se utilizó semen de tres machos sexualmente maduros (4.6 ± 1.6 kg). El semen fue diluido en una proporción 1:4 usando tres diferentes agentes crioprotectores (Dimetilsulfoxido 10% [DMSO], Metanol 10% [MET], Etilenglicol 5% [ETG]) con o sin la inclusión de yema de huevo 12% (YH) y glucosa 5.5%. Además, fueron evaluados dos sistemas de empaque (pajillas de 0.5 ml y macrotubos de 2.0 ml), las cuales fueron expuestas a vapores de nitrógeno líquido (NL) y luego almacenadas durante 8 meses. El semen fue descongelado en baño de agua a 37°C por 60 s y se determinó la motilidad masal (%) [MM], duración de la motilidad (s) [DM], integridad de membrana plasmática (%) [IMP] y fertilidad (%). La motilidad postdescongelación en todos los tratamientos fue significativamente diferente (P<0,05) al control siendo MET 2.0 ml el mejor (53 ± 5.8%). Respecto al control la DM tuvo un comportamiento similar para todos los tratamientos siendo solo diferente significativamente para ETG+YH 0.5 ml. La IMP se mantuvo sin diferencias significativas en MET 2.0 ml con respecto al control. La fertilidad fue significativamente menor en la mayoría de tratamientos con YH, siendo MET 2.0 ml el mejor (94.7 ± 0.6%). En conclusión, el semen de Colossoma macropomum es susceptible de crioconservación no siendo necesaria la utilización de YH en los diluyentes.

Abstract Cachama Negra (Colossoma macropomum) it´s a native fish of South America. In Colombia, there are no published studies on standardized protocols about their seminal cryopreservation. The implementation of this biotechnology would allow its continuous commercial production and introduction in genetic resources banks. The aim of this study was to evaluate the effects of cryopreservation on C. macropomum sperm subjected to different cryoprotectants and packaging systems in order to consolidate an efficient protocol for this specie. Semen from three sexually mature males (4.6 ± 1.6 kg) was used. The semen was diluted in a 1:4 ratio using three different cryoprotective agents (Dimethylsulfoxide 10% [DMSO], Methanol 10% [MET], Ethylene glycol 5% [ETG]); with or without the inclusion of 12% egg yolk (YH) and glucose 5.5%. In addition, two packing systems were evaluated (0.5 ml straws and 2.0 ml macrotubes), wich were exposed to liquid nitrogen (NL) vapors and then stored for 8 months. The sperm was thawed in a water bath at 37° C for 60 s and was determined the mass motility (%) [MM], motility duration (s) [DM], plasma membrane integrity (%) [IMP] and fertility (%). Post-thaw motility in all treatments was significantly different (P <0.05) to control, being MET 2.0 ml the best (53 ± 5.8%). Respect to the control the DM had a similar behavior for all treatments, being only significantly different for ETG+YH 0.5 ml. The IMP remained without significant differences in MET 2.0 ml with respect to the control. Fertility was significantly lower in the majority of treatments with YH, being MET 2.0 ml the best (94.7 ± 0.6%). In conclusion, semen of Colossoma macropomum is susceptible to cryopreservation, and the use of YH in diluents is not necessary.

Resumo O tambaqui (Colossoma macropomum) é um peixe nativo da América do Sul. Na Colômbia, não há trabalhos publicados sobre protocolos padronizados para sua criopreservação seminal. A implementação dessa biotecnologia permitiria sua produção comercial contínua e sua introdução nos bancos de genes. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da criopreservação no sêmen de C. macropomum submetido a diferentes crioprotectores e envases, e poder consolidar um protocolo eficiente para esta espécie. Foi utilizado sêmen de três machos sexualmente maduros (4.6 ± 1.6 kg). O sémen foi diluído em uma proporção 1:4 usando três diferentes agentes crioprotectores (10% de dimetil sulfóxido [DMSO], 10% de Metanol [MET] Etileno glicol 5% [ETG]), com e sem a presencia de gema de ovo ao 12% (YH) e glucose a 5.5%. Além foram avaliados dos sistemas de envase (palhetas de 0.5 ml e 2.0 ml de macrotubos) que foram expostos a vapores de nitrogênio líquido (NL) e armazenados por 8 meses em NL. O sémen foi descongelado em banho-água a 37 ° C durante 60 segundos e determinou-se a motilidade massal (%) [MM], duração de motilidade (s) [DM], a integridade da membrana plasmática (%) [IMP] e Fertilidade (%). A motilidade pós-descongelação nos tratamentos foi significativamente diferente (P<0.05) sendo a melhor combinação MET 2.0 ml (53 ± 5.8%) comprados com o controle. Em relação ao controle, o DM teve um comportamento similar para todos os tratamentos sendo significativamente diferente para o ETG+YH 0.5 ml. O IMP permaneceu sem diferenças significativas no MET 2.0 ml em relação ao controle. A fertilidade foi significativamente menor na maioria dos tratamentos com YH, sendo o MET 2.0 ml o melhor (94.7 ± 0.6%). Em conclusão, o sêmen Colossoma macropomum é suscetível à criopreservação e o uso de YH em diluentes não é necessário.

Parámetros genéticos para características de crecimiento, canal, calidad y espinas intramusculares en cachama blanca (Piaractus brachypomus) / Genetic parameters for growth, carcass, quality and intramuscular spine traits in white blanca (Piaractus brachypomus)

RESUMEN Los temas de la acuicultura en los que se requiere innovación e investigación están orientados al mejoramiento y al conocimiento genético de especies nativas. En este sentido, el presente estudio se concentró en estimar heredabilidades, correlaciones genéticas y fenotípicas para características de crecimiento, canal, calidad y espinas intramusculares derechas (EIMD), en cachama blanca (Piaractus brachypomus). La progenie de 12 hembras y 24 machos por fertilización artificial de una hembra por dos machos, es decir, doce familias de hermanos medios, fueron analizados por medio del paquete estadístico SAS 9.4 (SAS®, 2014). Se asumió un modelo lineal general univariado, con inclusión de los efectos fijos, como factores de entorno, estanque y edad y factores genéticos, como efectos aleatorios. Las heredabilidades, en general, para las variables de crecimiento, mostraron valores de medios a altos; para las variables de la canal presentaron valores bajos a medios; para las variables de calidad fueron bajos y, de particular interés para la EIMD, la magnitud de la estima fue de 0,11 ± 0,15. Las correlaciones estuvieron, generalmente, cercanas a la unidad entre características de crecimiento. Estas fueron significativamente positivas para peso corporal, a 180 días de edad, con la mayoría de variables, a diferencia con las variables de calidad, la correlación para rendimiento en canal con EIMD de -0,99 fue encontrada significativamente negativa. Los resultados del estudio destacan el potencial para mejorar características de crecimiento, de canal y de calidad, a través de la explotación de la variación genética aditiva observada.

ABSTRACT The topics of aquaculture in which innovation and research are required are directed towards the improvement and genetic knowledge of native species. In this sense the present study concentrated on the estimation of heritabilities, genetic and phenotypic correlations for growth, carcass, quality and right intramuscular spines (RIMS) in white cachama (Piaractus brachypomus). The progeny of 12 females and 24 males by artificial fertilization of a female by two males, that is to say twelve half-sib families, were analyzed by means of the statistical package SAS 9.4 (SAS®, 2014), assumed an univariate general linear model with inclusion of Fixed effects such as environmental factors, pond and age as fixed effects and genetic factors as random effects. Heritabilities in general for growth variables showed medium to high values; for carcass variables, presented low to medium values; And for the quality variables were low; For the RIMS the magnitude of the estimate was 0,11 ± 0,15. The correlations were generally close to unity between growth characteristics. These were significantly positive for body weight at 180 days of age with most variables unlike quality variables; the correlation for channel performance with RIMS of -0.99 was found to be significantly negative. The results of the study highlight the potential to improve growth, carcass and quality traits through the exploitation of the additive genetic variation observed in this study.

Efecto del protocolo de inducción hormonal en la espermiación y las características seminales de yaque ( Leiarius marmoratus ) / Effect of hormone induction protocol in the spermiation and seminal characteristics of yaque (Leiarius marmoratus) / Efeito do protocolo de indução hormonal sobre a spermiação e as características do sêmen do yaque (Leiarius marmoratus)

Resumen El yaque Leiarius marmoratus, es una especie de siluriforme nativo con gran potencial para la diversificación de la acuicultura colombiana; sin embargo, la espermiación en cautiverio aún presenta dificultades debido al bajo volumen seminal liberado con los protocolos de inducción tradicionales. En consecuencia, el objetivo fue evaluar los efectos de cinco protocolos de inducción hormonal, basados en Extracto de Hipófisis de Carpa (EHC), sGnRHa + domperidona (OVAPRIM®) y Gonadotropina Coriónica Humana (GHC) (FERTIVET®), sobre la calidad y volumen seminal de la especie. Fueron seleccionados 18 machos sexualmente maduros de 54,4 ± 2,2 cm de longitud total y 1,6 ± 0,1 kg peso corporal. Se evaluaron 5 tratamientos, así: T1: 0,25 ml/kg (0 h) y 1 ml/kg de OVAPRIM® (12 h); T2: 1 mg/kg de EHC (0 h) y 3 mg/kg de EHC (12 h); T3: dosis única de 200 UI/kg de GCH; T4: 3 mg/kg de EHC (0 h) y 200 UI/Kg de GHC (8h); T5: 1 ml/kg de OVAPRIM® (0h) y 200 UI/kg de GHC (8h); Control: 1 ml de suero fisiológico. El semen se colecto 6 h después de aplicada la última dosis hormonal. El T1 y T5 mostraron un volumen mayor (p<0,05) (5,4 ± 1,1; 4,8 ± 1,2 ml) cuando comparados con T2 (3,1 ± 1ml), T3 (2,3 ml) T4 (2,4 ± 1,1 ml) y el control (0,2 ml). En cuanto a la movilidad y tiempo de activación, T1 y T5 presentaron los mejores resultados (90 ± 0% y 54,2 ± 7 s; 90 ± 0% y 52,9 ± 3,8 s, respectivamente). La concentración espermática fue mayor (p<0,05) en T2 y T5 (1,275 ± 322; y 1,261 ± 225 sptz x 103/µl) comparadas con los otros tratamientos. Se concluye que la inducción hormonal con OVAPRIM® combinada con HCG, son efectivas para la producción seminal en la especie.

Abstract The yaque Leiarius marmoratus is specie of native silurid, with great potential for the diversification of the colombian aquaculture; however, the spermiation in captive yet presents difficulties due to the low seminal volume released with traditional induction protocols. In consequence, the aim of this study was to evaluate the effects of five protocols of hormonal induction based on carp pituitary extract (EHC), sGnRHa + domperidone (OVAPRIM®) and human chorionic gonadotropin (GHC) (FERTIVET®) on seminal quality and volume of the specie. Were selected 18 sexually mature males of 54,4 ± 2,2 cm in total length and 1,6 ± 0,1 kg body weight. 5 treatments were evaluated so: T1 : 0,25 ml/kg (0 h) and 1 ml/kg of OVAPRIM® (12 h ); T2: 1 mg/kg of EHC (0 h) and 3 mg/kg of EHC (12 h) ; T3 : single dose of 200 UI/kg HCG; T4: 3 mg/kg of EHC (0 h) and 200 UI /kg GHC (8h) ; T5: 1 ml/kg of OVAPRIM® (0h) and 200 U.I / kg of GHC (8h) ; Control: 1 ml of saline solution. Semen was obtained 6 hours after the last dose hormone. T1 and T5 showed a larger volume (p<0.05) (5,4 ± 1,1, 4,8 ± 1,2 ml) compared to T2 (3,1 ± 1ml), T3 (2,3 ml) T4 (2,4 ± 1.1 ml) and control (0.2 ml). Regarding motility and activation time, T1 and T5 had the best results (90 ± 0 % and 54,2 ± 7 s; 90 ± 0 % and 52,9 ± 3,8 s, respectively). The sperm concentration was higher in (p<0,05) T2 and T5 (1,275 ± 322, ± 225 and 1,261 sptz x 103/ul) compared with the other treatments. In conclusion, hormonal induction with OVAPRIM® combined with HCG, are effective for the seminal production in the specie.

Resumo O yaque Leiarius marmoratus, é uma espécie siluriforme nativa com grande potencial para a diversificação da aquicultura colombiana; No entanto, a spermiação em cativeiro ainda apresenta dificuldades devido ao baixo volume seminal liberado com protocolos de indução tradicionais. Por conseguinte, o objetivo foi avaliar os efeitos de protocolos de indução de cinco hormonais base de extrato de hipófise de carpa (EHC), sGnRHa + domperidona (Ovaprim®) e Gonadotropina coriónica humana (GHC) (FERTIVET®) sobre a qualidade e volume seminal das espécies. Foram Selecionados 18 machos sexualmente maduros de 54,4 ± 2,2 cm de comprimento total e 1,6 ± 0,1 kg de peso corporal. Foram avaliados cinco tratamentos: T1: 0,25 ml / kg (0 h) e 1 ml / kg de OVAPRIM® (12 h); T2: 1 mg / kg de EHC (0 h) e 3 mg / kg de EHC (12 h); T3: dose única de 200 UI / kg de HCG; T4: 3 mg / kg de EHC (0 h) e 200 UI / kg de GHC (8h); T5: 1 ml / kg de OVAPRIM® (0h) e 200 UI / kg de GHC (8h); Controle: 1 ml de solução salina fisiológica. O sêmen foi coletado 6 h após a última dose hormonal foi aplicada. T1 e T5 mostraram um volume maior (p <0,05) (5,4 ± 1,1, 4,8 ± 1,2 ml) quando comparado com T2 (3,1 ± 1 ml), T3 (2,3 ml) T4 (2,4 ± 1,1 ml) e controle (0,2 ml). Em relação à mobilidade e ao tempo de ativação, T1 e T5 apresentaram os melhores resultados (90 ± 0% e 54,2 ± 7 s, 90 ± 0% e 52,9 ± 3,8 s, respectivamente). A concentração de esperma foi maior (p <0,05) em T2 e T5 (1275 ± 322 e 1261 ± 225 sptz x 103 / µl) em comparação com os outros tratamentos. Conclui-se que a indução hormonal com OVAPRIM® combinada com HCG, é efetiva para a produção seminal nas espécies.

Evaluación del sistema de marcaje físico visible (V.I.E) en cachama blanca (Piaractus brachypomus)

La identificación de individuos en la piscicultura se ha venido estableciendo como un proceso estándar, lo que implica la utilización de un sistema de marcaje eficiente, práctico y económico. Este estudio evaluó el sistema de marcaje físico visible (V.I.E) con relación al crecimiento, sobrevivencia, retención y visibilidad en alevinos de cachama blanca (Piaractus brachypomus). Para este propósito, fueron usados 400 peces en dos experimentos con 200 peces cada uno; experimento 1 (4.5 ± 0.9 g) y experimento 2 (8.26 ± 1.94 g) evaluadas durante un periodo de 30 días, repartidos al azar en 4 tanques de 250 litros. Después de un periodo de aclimatación de 8 días y siguiendo las indicaciones del fabricante, se marcaron 128 peces con 8 colores: Azul, rojo, verde, amarillo, naranja, rosado (fluorescentes), café y morado (no fluorescentes), en dos posiciones corporales (dorso y opérculo) definidas en ensayos preliminares. Los animales no marcados (72) pero sometidos al mismo procedimiento, se utilizaron como control. Los peces en su totalidad, se midieron y pesaron al inicio y al final de cada experimento. Para ninguno de los experimentos se determinó efecto del implante sobre el crecimiento (p<0,05) entre los peces marcados y el control. La sobrevivencia en ambos experimentos fue del 100%. La retención en el dorso y opérculo en promedio para los dos experimentos fue de 94.11% y 57.52%, respectivamente. La visibilidad con luz UV y sin luz UV en el opérculo fue de 96.6% y 77.7% y para el dorso fue de 92.6% y 61.5%, respectivamente. En conclusión la posición más viable para el uso del V.I.E en animales de baja talla, es el dorso debido a su alto porcentaje de retención, preferiblemente utilizando los colores fluorescentes bajo exposición a luz UV.

Identifying individuals in fish-farming has become standard procedure, thereby implying the use of an efficient, practical and economic tagging system. This study evaluated the visible implant elastomer (VIE) system related to growth, survival, retention and visibility in cachama/pacu (Piaractus brachypomus) fry. The study involved using 400 fish in two experiments (200 fish in each experiment): experiments 1 (4.5 ± 0.9 g) and 2 (8.26 ± 1.94 g) were evaluated over a 30-day period, the fry being randomly distributed in four 250-liter tanks. Following an 8-day acclimatisation period, 128 fish were tagged with 8 colours (following the manufacturer's instructions): blue, red, green, yellow, orange, pink (fluorescent), Brown and purple (non-fluorescent); they were tagged on two parts of the body (dorsal/back and operculum/cheek area) which had already been defined in preliminary trials. Untagged fry (72) kept in the same conditions were used as control. All fry were measured and weighed at the start and finish of each experiment. It was determined that the implant/tag had no effect on growth (p<0.05) in either tagged fry or control. The survival of both types of fry in both experiments was 100%. Tag retention in both experiments regarding the back was 94.11% on average and 57.52% for the cheek area. Visibility with UV light was 96.6% on the cheek area and 92.6% for the back and without UV light 77.7% for the cheek area and 61.5% for the back. It can thus be stated that the dorsal/back area is the most viable position for using VIE with low-weight fry due to the high retention percentage, preferably using fluorescent reporters under UV light.

A identificação de indivíduos na piscicultura se tem estabelecido como um processo regular, o que implica a utilização de um sistema de marcação eficiente, prático e económico. Este estudo avaliou o sistema de marcação física visível em relação ao crescimento, sobrevivencia, retenção e visibilidade em alevinos de cachama blanca (Piaractus brachypomus). Para este propósito, 400 peixes foram usados em dois experimentos com 200 peixes cada, experimento 1 (4.5 ± 0.9 g) e experimento 2 (8.26 ± 1.94 g) avaliados durante um período de 30 dias, repartidos ao acaso em quatro tanques de 250 litros. Uma vez aclimatados os peixes e seguindo as indicações do fabricante, marcaram-se 128 peixes com oito cores: Azul, vermelho, verde, amarelo, laranja, rosado (fluorescentes), café e morado (não fluorescentes), em duas posições corporais (Dorso e opérculo) definidas em ensaios preliminares. Os animais não marcados (72) submetidos ao mesmo procedimento se utilizaram como controle. Os peixes em sua totalidade foram medidos e pesados ao início e ao final da cada experimento. Não foi determinado efeito do implante sobre o crescimento (p<0,05) entre os peixes marcados e o controle para nenhum dos experimentos. A sobrevivência em ambos experimentos foi de 100%. A retenção no dorso e opérculo em média foi de 94.11% e 57.52%, respectivamente para os dois experimentos. A visibilidade com luz UV e sem luz UV no opérculo foi de 96.6 % e 77.7% e para o dorso foi de 92.6% e 61.5%, respectivamente. Em conclusão a posição mais viável para o uso do V.I.E em animais de baixa talha, é o dorso devido a sua alta percentagem de retenção, preferivelmente utilizando as cores fluorescentes baixo exposição a luz UV.

Effect of culture medium on growth and protein content of Chlorella vulgaris / Efecto del medio de cultivo sobre el crecimiento y el contenido proteico de Chlorella vulgaris / Efeito do diferentes meios de cultura sobre o crescimento e o conteúdo proteico em Chlorella vulgaris

The use of live food in larviculture and fingerling stages has become an excellent option in pisciculture to reduce mortality and production costs. Live food is cost-effective, nutritious, and it has enzymes necessary for fish development. Objective: this study evaluated the effect of several culture media (chu10 , NPK complex fertilizer, worm humus, and equine manure) on growth and protein content of Chlorella vulgaris. Methods: 3 L volumes with constant light and aeration were used for algae culture. Six replicates were used per each treatment. One mL of C. vulgaris was added to each experimental unit to obtain 8.3 x 10(6) cel/mL as initial density. Algae counts were conducted every two days using the Neubauer chamber to determine cell density, parameters such as temperature, dissolved oxygen, pH, nitrates, and phosphates were measured. Crude protein was determined with the Kjeldahl method. The assay lasted 82 days. Results: microalgae reached the highest density with complex fertilizer NPK (10.9 ± 1.6 x 10(6) cel/mL) on day 22, followed by worm humus (5.3 ± 1.1 x 10(6) cel/mL) on day 48, equine manure (4.9 ± 0.9 x 10(6) cel/mL) on day 18, and the last was chu10 (2.2 ± 0.6 x 10(6) cel/mL) on day 12. The highest protein content was found in algae grown in worm humus (56.8%), and the equine manure (32.5%), in contrast, complex fertilizer NPK had the lowest value (16.8%). Conclusion: this study showed that organic media are a good choice for the culture of C. vulgaris, providing proper growth and high protein content of microalgae.

En piscicultura, el uso de alimento vivo durante las fases de larvicultura y alevinaje se ha convertido en una opción para reducir la tasa de mortalidad y los costos de producción, debido a que es económico, nutritivo y posee enzimas necesarias para el desarrollo de las larvas de peces. Objetivo: el presente trabajo evaluó el efecto de diferentes medios de cultivo (chu10, fertilizante complejo NPK, humus de lombriz y equinaza) sobre el crecimiento y el contenido proteico en Chlorella vulgaris. Métodos: para su cultivo se utilizaron volúmenes de 3 L, con luz y aireación constante. De cada tratamiento se realizaron seis réplicas y en cada unidad experimental se adicionó 1 mL de C. vulgaris con una densidad de 8.3 x 10(6) cel/mL. Para determinar la densidad celular se realizaron conteos cada dos días haciendo uso de cámara de Neubauer. Se midió temperatura, oxígeno disuelto, pH, nitratos y fosfatos. La proteína cruda se determinó por el método de Kjeldahl. La duración total del ensayo fue de 82 días. Resultados: la microalga alcanzó su mayor densidad con fertilizante complejo NPK (10.9 ± 1.6 x 10(6) cel/mL) en el día 22, seguido del humus de lombriz (5.3 x 106 ± 1.1 x 10(6) cel/mL) en el día 48, equinaza (4.9 ± 0.9 x 10(6) cel/mL) en el día 18, y por último con el chu10 (2.2 ± 0.6 x 10(6) cel/mL) en el día 12. Se encontró mayor contenido proteico en las células cultivadas en humus de lombriz (56.8%) y equinaza (32.5%); a diferencia, el del fertilizante complejo NPK fue muy bajo (16.8%). Conclusiones: este estudio permite concluir que los medios orgánicos son una buena opción para cultivar C. vulgaris, otorgando un adecuado crecimiento y un alto contenido proteico de la microalga.

Na piscicultura, o uso de alimento vivo durante as fases da cultura de larvas e juvenis têm sido convertidos em uma opção para reduzir a taxa de mortalidade e os custos de produção, porque é econômico, nutritivo e possui as enzimas necessárias para o desenvolvimento das larvas de peixe. Objetivo: o objetivo desta pesquisa foi avaliar a efeito de diferentes meios de cultura (chu10, fertilizante mineral complexo NPK, vermicomposto e esterco equino) sobre o crescimento e o conteúdo proteico em Chlorella vulgaris. Métodos: para a cultura, foram utilizados volumes de 3 L, com luz e aeração permanente. De cada tratamento, realizaram-se seis repetições e em cada unidade experimental, adicionou-se 1 mL de C. vulgaris com uma densidade de 8.3 x 10(6) cel/mL. Para determinar a densidade celular, realizaram-se contagens a cada dois dias usando a câmara de Neubauer. Aferiu-se a temperatura, oxigênio dissolvido, pH, nitratos e fosfatos. A proteína bruta foi determinada por o método de Kjeldahl. A duração total do ensaio foi de 82 dias. Resultados: os resultados mostraram que a microalga alcançou sua maior densidade com o fertilizante complexo NPK (10.9 ± 1.6 x 10(6) cel/mL) no dia 22, seguido do vermicomposto (5.3 ± 1.1 x 10(6) cel/mL) no dia 48, o esterco equino (4.9 ± 0.9 x 10(6) cel/mL) no dia 18 e por último com o chu10 (2.2 ± 0.6 x 10(6) cel/mL) no dia 12. Foi encontrado maior conteúdo proteico nas células cultivadas em vermicomposto (56.8%) e esterco equino (32.5%); a diferença, do fertilizante complexo NPK que foi muito baixo (16.8%). Conclusões: este estudo permitiu concluir que os meios orgânicos são uma boa opção para cultivar C. vulgaris, obtendo um crescimento adequado e um alto conteúdo proteico da microalga.

Adaptation to a commercial diet alters post-larvae growth and development of striped catfish (Pseudoplatystoma sp) and yaque (Leiarius marmoratus) / Crecimiento y sobrevivencia de post-larvas de bagre rayado (Pseudoplatystoma sp) y yaque (Leiarius marmoratus) consumiendo una dieta seca / Crescimento e sobrevivência de pós-larvas do pintado (Pseudoplatystoma sp) e yaque (Leiarius marmoratus) alimentadas com ração seca

The main challenges facing fish farming include the optimization of Silurid fingerling production through efficient larval rearing and nursery management. This study evaluated growth performance of catfish (Pseudoplatystoma sp) and yaque (Leiarius marmoratus) post-larvae during adaptation to commercial diet containing 40% crude protein of animal origin (e.g., bovine liver and heart). A total of 240 L. marmoratus and Pseudoplatystoma sp. post-larvae were selected at 16 days of age. Postlarvae average weight and lengh were 57.2 ± 4.8 mg and 17.1 ± 1.4 mm for L. marmoratus, and 55.9 ± 6.6 mg and 13.5 ± 2.7 mm for Pseudoplatystoma sp, respectively. Housing density was 4 larvae / L. Four treatments (T) were evaluated, with five replicates each, as follows: T1: commercial feed (C), T2:C + bovine heart (CO), T3: C + liver (HI), and T4: C + liver + fish oil (HI + AP). The best weight gain for larvae of L. marmoratus was observed in T4 (3213 ± 278 mg). For Pseudoplatystoma sp., no significant differences were observed between treatments, although T2 was numerically better (695 ± 149 mg). In conclusion, conditioning to a dry diet was more effective for L. marmoratus post-larvae compared to Pseudoplatystoma sp. This is mainly due to the attractiveness and digestibility of the feed, as well as certain post-larvae characteristics (e.g., development of the digestive tract). It is necessary to conduct specific studies related to the ontogenetic development of the digestive tract to uncover the nutritional needs of each species during growth to match allowances with specific dietary requirements.

El principal desafío de la piscicultura con silúridos consiste en optimizar la producción de alevinos mediante prácticas eficientes de larvicultura y alevinaje. El presente estudio evaluó el desempeño productivo de post-larvas de bagre rayado (Pseudoplatystoma sp) y de yaque (Leiarius marmoratus) durante su acostumbramiento a una dieta comercial del 40% de proteína bruta de origen animal (ej: hígado y corazón de bovino). Fueron seleccionadas 240 post-larvas de L. marmoratus y de Pseudoplatystoma sp de 16 días de edad, con peso y talla promedio de 57.2 ± 4.8 mg y 17.1 ± 1.4 mm para L. marmoratus, y de 55.9 ± 6.6 mg y 13.5 ± 2.7 mm para Pseudoplatystoma sp, respectivamente. La densidad de alojamiento fue de 4 larvas/L. Fueron evaluados 4 tratamientos (T) con cinco réplicas cada uno, así: T1: alimento balanceado comercial (C); T2: C + corazón de bovino (CO); T3: C + hígado (HI) y; T4: C + hígado + aceite de pescado (HI+AP). La mejor ganancia de peso para larvas de L. marmoratus se observó en el T4 (3213 ± 278 mg). Para Pseudoplatystoma sp no se observaron diferencias significativas entre tratamientos, aunque el mejor resultado numérico fue para el T2 (695 ± 149 mg). En conclusión, el acondicionamiento a dieta seca fue más eficiente en post-larvas de L. marmoratus que en Pseudoplatystoma sp, debido principalmente a la atractabilidad y digestibilidad del alimento, así como a características de las post-larvas (desarrollo del tracto digestivo). Se hace necesario realizar estudios específicos de desarrollo ontogénico relacionados con las características del tracto digestivo que permitan evidenciar las necesidades nutricionales de cada especie durante su crecimiento, para formular dietas acordes con los requerimientos específicos.

O principal desafio da aquicultura com silúridas é optimizar a produção de alevines mediante práticas eficientes de larvicultura e alevinagem. O presente estudo avaliou o desempenho produtivo de pós-larvas de pintado (Pseudoplatystoma sp) e Yaque (Leiarius marmoratus) durante o período de adaptação a uma dieta comercial com 40% de proteína bruta de origem animal (por exemplo, fígado e coração de bovino). Foram seleccionados 240 pós-larvas de L. marmoratus e Pseudoplatystoma sp 16 dias de idade, peso e comprimento médio de 57.2 ± 4.8 mg e 17.1 ± 1.4 mm para L. marmoratus, e 55.9 ± 6.6 mg e 13.5 ± 2.7 mm para Pseudoplatystoma sp, respectivamente. A densidade de alojamento foi de 4 larvas/L. Foram avaliados quatro tratamentos (T), com cinco repetições, conforme segue: T1: ração comercial (C), T2: C + coração (CO), T3: C + fígado (HI) e T4: C + fígado + óleo de peixe (HI + AP). O melhor ganho de peso para as larvas de L. marmoratus foi observado no T4 (3213 mg ± 278). Para Pseudoplatystoma sp não houve diferenças significativas entre os tratamentos, embora o resultado numérico foi melhor para o T2 (695 mg ± 149). Em conclusão, condicionado à dieta seca foi mais eficaz no pós-larvas de L. marmoratus que no Pseudoplatystoma sp, principalmente devido à atractividade e digestibilidade de alimentos para animais,bem como características de pós-larvas (desenvolvimento do trato digestivo). É necessário realizar estudos específicos relacionados com o desenvolvimento ontogênico das características do aparelho digestivo que revelam as necessidades nutricionais de cada espécie durante o seu crescimento para fazer concessões em conformidade com os requisitos específicos.

Evaluación del crecimiento y sobrevivencia de larvas de bagre rayado Pseudoplatystoma fasciatum (Linneaus, 1766) alimentadas con alimento vivo natural y enriquecido con ácidos grasos / Growth and survivability of bagre rayado (Pseudoplatystoma fasciatum; Linneaus, 1766) larvae fed live feed enriched with fatty acids / Avaliação do crescimento e a sobrevivência de larvas de bagre rayado Pseudoplatystoma fasciatum (Linneaus, 1766) alimentadas com alimento vivo natural ou enriquecido com ácidos graxos

La producción de silúridos en etapas larvales implica un suministro adecuado de alimento, el cual debe suplir las necesidades nutricionales en cada especie. El uso de zooplancton nativo como alimento vivo y su sometimiento a procesos de enriquecimiento con ácidos grasos vegetales han permitido en parte alcanzar este objetivo, no obstante, su evaluación en cada una de las especies aún es necesaria. Por lo anterior, el objetivo del presente trabajo fue evaluar el crecimiento y sobrevivencia de larvas de bagre rayado Pseudoplatystoma fasciatum alimentadas con alimento vivo enriquecido con ácidos grasos. Para esto, fueron utilizadas larvas de 3 dpe obtenidas por reproducción artificial, las cuales fueron alimentadas 4 veces al día, durante 15 d con nauplios de Artemia y zooplancton nativo (Diaphanosoma sp. y Moina sp.) no enriquecidos y enriquecidos con una emulsión a base de 20% de Aceite de Canola, 7% de Lecitina de Soya y 73% de agua destilada, para suministrar 4 tratamientos: T1: Artemia Natural; T2: Artemia Enriquecida; T3: Cladóceros Natural; T4 Cladóceros Enriquecidos). Como resultados, el tratamiento que presentó la mayor ganancia de peso y talla fue el de larvas alimentadas con Artemia (91.9 ± 13.6 mg y 17.3 ± 1.1 mm, respectivamente), y la menor el tratamiento correspondiente a cladóceros enriquecidos con ácidos grasos (20.3 ± 2.5 mg y 9.9 ± 0.5 mm, respectivamente), sin embargo, las tasas más altas de sobrevivencia fueron observadas en los tratamientos de larvas alimentadas con cladóceros enriquecidos y no enriquecidos (58.8 ± 3.2 y 63.1 ± 6.4%, respectivamente), cuando comparadas con los tratamientos alimentados con artemia y artemia enriquecida (42.1 ± 9.3 y 49.8 ± 5.2%, respectivamente). En conclusión se observó que los procedimientos de enriquecimiento de zooplancton nativo aumentan la sobrevivencia larval en la especie, aun cuando las tasas de crecimiento son menores a las obtenidas con Artemia.

The larval stages of Catfish require an adequate provision of feed to meet its nutritional requirements. Native zooplankton enriched with fatty acids has been used as live feed to achieve this objective. However, this feed should be evaluated for each particular species. Therefore, this study evaluated growth and survival of Bagre rayado (Pseudoplatystoma fasciatum) larvae fed live feed enriched with fatty acids. Bagre rayado larvae were obtained by artificial reproduction. Larvae were fed four times per day during 15 days. Live feed consisted of Artemia nauplii and native zooplankton (Diaphanosoma sp. and Moina sp.) non-enriched or enriched with a mixture containing 20% canola oil emulsion, 7% soya lecithin, and 73% distilled water. Dietary treatments were: T1 (non-enriched Artemia), T2 (enriched Artemia), T3 (non-enriched cladocerans), and T4 (enriched cladocerans). The highest weight gain and size were observed for T1 (91.9 ± 13.6 mg and 17.3 ± 1.1 mm, respectively), while the lowest were for T4 (20.3 ± 2.5 mg and 9.9 ± 0.5 mm, respectively). Nevertheless, the highest survival rates were observed for larvae fed enriched and non-enriched cladocerans (58.8 ± 3.2 and 63.1 ± 6.4%, respectively) in comparison with Artemia and enriched Artemia (42.1 ± 9.3 and 49.8 ± 5.2%, respectively). In conclusion, native zooplankton increased larval survival, although growth rates were lower than those obtained with Artemia.

Para a produção de silurídeos, durante a fase larval é necessario o fornecimento de alimento que satisfaga as necessidades nutricionais da espécie. O uso de zooplâncton nativo natural ou submetido a enriquecimento com ácidos graxos de origem vegetal tem permitido, em parte, atingir esse objetivo; No entanto, sua avaliação em cada uma das espécies é mesmo necessária. Por tanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento e a sobrevivência de larvas do Bagre Rayado (Pseudoplatystoma fasciatum) alimentadas com zooplâncton vivo, enriquecido ou não com ácidos graxos. Para tal propósito, foram utilizadas larvas de 3 dias de idade, obtidas mediante reprodução artificial, as quais foram alimentadas 4 vezes ao dia, durante 15 d, com nauplios de Artemia ou zooplâncton nativo (cladóceras dos gêneros Diaphanosoma sp e Moina sp.) enriquecidas ou não com uma emulsão composta de 20% de óleo de canola, 7% de lecitina de soja e 73% de água destilada, para obter 4 tratamentos: T1, Artemia; T2, Artemia enriquecida; T3, Cladóceras; T4 Cladóceras enriquecidas. Os resultados revelaram que as larvas alimentadas com Artemia apresentaram ou maior ganho de peso e cumprimento corporal (91.9 ± 13.6 de mg e 17.3 ± 1.1 mm, respectivamente), em tanto que as larvas alimentadas com cladóceras enriquecidas com ácidos graxos foram as mais pequenas (20.3 ± 2.5 mg e 9.9 ± 0.5 mm, respectivamente); contudo, as maiores taxas de sobrevivência foram obtidas nos tratamentos de larvas alimentadas com cladóceras enriquecidas e não enriquecidas (58.8 ± 3.2 e 63.1 ± 6.4%, respectivamente), quando comparadas com os tratamentos baseados em Artemia natural e enriquecida (42.1 ± 9.3 e 49.8 ± 5.2%, respectivamente). Em conclusão, o estudo revelou que o enriquecimento do zooplâncton nativo aumenta a sobrevivência das larvas, porem as taxas de crescimento podem ser menores ás obtidas com Artemia.

Desempeño productivo del yaque (Leiarius marmoratus Gill, 1870) bajo diferentes densidades de siembra en estanques en tierra / Productive performance of yaque (Leiarius marmoratus Gill, 1870) under different stocking densities in ground ponds / Desempenho produtivo do yaque (Leiarius marmoratus Gill, 1870) sob diferentes densidades de cultivo em viveiros de terra

La producción comercial de especies pertenecientes a la familia de los silúridos o bagres es una alternativa que empieza a ser considerada en muchos países, generando gran interés especies como el yaque (Leiarius marmoratus), debido a su buen desempeño en cultivo y fácil adaptación a consumo de dieta seca. En consecuencia, el presente trabajo evaluó el desempeño productivo del yaque bajo diferentes densidades de siembra, a partir de alevinos previamente acondicionados a consumo de concentrado comercial, durante un periodo productivo de cinco meses en estanques en tierra. Fueron utilizados 591 peces de tres meses de edad, con un peso promedio inicial de 20.4 ± 2.4 g y una talla inicial de 12.2 ± 2.4 cm, distribuidos en 3 densidades de siembra (0.5, 1 y 2 peces/m²) y alimentados 3 veces al día con concentrado comercial de 30% PB. Se obtuvieron resultados favorables para la densidad de siembra de 1 pez/m², con los valores más altos en cuanto a ganancia de peso (549±42.8 g), ganancia de talla (28.1 ± 0.8 cm), ganancia diaria de peso (3.01±0.23 g/día), tasa de crecimiento específico (2.14 ± 0.07%) y factor de crecimiento relativo (14.4 ± 2.95). De acuerdo con los resultados, se puede concluir que la densidad de 1 pez/m² es la más adecuada para el cultivo comercial de Leiarius marmoratus, bajo las condiciones experimentales descritas.

The commercial production of catfish species is increasing in several countries. One of these species, the so called yaque fish (Leiarius marmoratus) has interesting potential due to its good performance and adaptation to dry diets. Therefore, the present study evaluated the productive performance of yaque under several stocking densities. Fingerlings were previously conditioned to a commercial diet for five months in ground ponds. A total of 591 fish, aged three months post-hatching, were used. The initial fish weight was 20.4 ± 2.4 g and the initial size was 12.2 ± 2.4 cm. Fish were distributed under three stocking densities (0.5, 1 and 2 fish/m²) and were fed three times per day with a commercial diet (30% CP). The intermediate density (1 fish/m²) resulted in the best gain (549 ± 42.8 g), height gain (28.1 ± 0.8 cm), average daily gain (3.01 ± 0.23 g/día), specific growth rate (2.14 ± 0.07%) and relative growth factor (14.4 ± 2.95).

A produção comercial de espécies de peixes pertencentes à família dos silurídeos o bagres é uma alternativa que começa a considerar-se em muitos países, tendo grande interesse em espécies como o Yaque (Leiarius marmoratus), devido ao seu bom desempenho no cultivo e fácil adaptação ao consumo de rações secas. Por tanto, o presente trabalho avaliou o desempenho produtivo do Yaque sob diferentes densidades de cultivo, a partir de alevines acostumados previamente ao consumo de ração artificial, durante um período de cultivo de cinco meses em viveiros em terra. Foram utilizados 591 peixes de três meses de idade, com peso corporal médio de 20.4 ± 2.4 g e cumprimento inicial de 12.2 ± 2.4 cm, distribuídos ao acaso em 3 densidades de alojamento (0.5, 1 y 2 peixes/m²) e alimentados 3 vezes ao dia com ração comercial de 30% de PB. Foram obtidos resultados favoráveis pra a densidade de 1 peixe/m² apresentando os valores más altos em quanto o ganho de peso (549 ± 42.8 g), ganho em cumprimento (28.1 ± 0.8 cm), ganho diário de peso corporal (3.01 ± 0.23 g/día), taxa de crescimento específico (2.14 ± 0.07%) e fator de crescimento relativo (14.4 ± 2.95). De acordo com os resultados, pode-se concluir que a densidade de 1 peixe/m² é a más adequada para o cultivo de Leiarius marmoratus ao nível comercial sob as condições experimentais descritas.

Morfología testicular del yaque Leiarius marmoratus (Pisces: Siluridae) en estadio de madurez reproductiva / Testicular morphology of yaque Leiarius marmoratus(Pisces: Siluridae) in maturity reproductive stage

El conocimiento de la morfología y fisiología del testículo, permite generar bases para el entendimiento del comportamiento reproductivo de las especies, ya que diferencias anatómicas están relacionadas con el desempeño reproductivo. Con el fin de contribuir al conocimiento biológico y reproductivo del yaque Leiarius marmoratus, fueron analizadas las características anatómicas, morfológicas y funcionales del testículo en animales durante el estado de madurez reproductiva. En L. marmoratus los testículos están ubicados ventralmente a la vejiga gaseosa y presentan numerosas y largas digitaciones que terminan en un conducto espermático. Microscópicamente se encontró que el testículo es espermatogonial irrestricto de tipo tubular, donde la porción anterior presenta actividad espermatogénica, que disminuye en la porción media y desaparece en la región distal, dando paso a tejido glandular con actividad secretora, que actúa como vesícula seminal. Al interior de cada túbulo testicular, se observan cistos que contienen células espermáticas en el mismo estadio de desarrollo. Basados en las características microscópicas, fueron identificados espermatocitos, espermátides y gran cantidad de espermatozoides libres en el lumen. También fueron identificadas células glandulares, tejido muscular liso y tejido epitelial. En el ducto espermático (región media y distal), se encontró abundante secreción acidofílica que en algunas regiones estaba acompañada de espermatozoides libres.

Knowledge of the morphology and physiology of the testis, leads to generate bases for understanding the reproductive behavior of species, because the anatomical differences are related to reproductive performance. To contribute to biologic and reproductive knowledge of Yaque Leiarius marmoratus, anatomic, morphologic and functional characteristics of the testis in animals in a state of reproductive maturity were analyzed. In L. marmoratus, the testicles are located ventrally to the gas bladder and have many long finger-like structures that finish in spermatic duct. Microscopically it was found that the testis is espermatogonial unrestricted and tubular type, where the anterior portion presented spermatogenic activity, which diminishes in the medium portion and disappears in the caudal portion, leading to tissue with glandular secretory activity serving as a seminal vesicle. Inside each tubule of the testis, there are cysts containing sperm cells within the same stage of development. Based on microscopic features, were identified spermatocytes, spermatids and a large amount of free sperm into the lumen. Glandular cells were also identified, as well as smooth muscle tissue and epithelial tissue. In the spermatic duct (medium and distal portion), acidophilous secretion was abundant and in some regions were accompanied by free spermatozoa.

Determinación del espermatocrito y efecto del volumen de la dosis seminante sobre la fertilidad en yamú (Brycon amazonicus) / Determination of spermatocrit and effect of volume of insemination dose on fertility in yamú (Brycon amazonicus)

El yamú (Brycon amazonicus . Spix & Agassiz 1829) es un pez omnívoro de rápido crecimiento y carne de alta calidad y aceptación comercial. Para estandarizar el espermatocrito (SPCTO), 23 muestras de semen fueron centrifugadas a 14000 g durante 1, 3, 5, 7 ó 10 min. El tiempo de centrifugación tuvo un efecto significativo sobre el valor del espermatocrito (SPCTO) (p<0.05). Para conocer la concentración espermática (CE) durante la época reproductiva y su relación con el SPCTO, la espermiación de 40 machos fue inducida con extracto de hipófisis de carpa (4.0 mg.kg -1). La CE fue evaluada mediante cámara de Neubauer (dilución 1:1200) y el SPCTO por centrifugación a 14000 g durante 5 min. La relación entre SPCTO y CE fue positiva y altamente significativa (y= 1.69 + 0.59x; r2= 0.74; p<0.0001), pero no se observaron diferencias estadísticas (p>0.05) entre los meses evaluados (marzo, abril y mayo). Finalmente, para determinar el efecto del volumen de la dosis seminante sobre la fertilidad, 2 g de oocitos fueron seminados con 3, 15, 45, 90 o 180 mL de semen (n= 12), cuya CE fue previamente ajustada para contener 50000 espermatozoides (sptz)/oocito, utilizando como diluyente plasma seminal homólogo. Los porcentajes de fertilidad fueron 83, 86, 86, 85 y 87 por ciento, respectivamente (p>0.05).

Aspectos generales de la crioconservación espermática en peces teleósteos / General aspects of the spermatic cryopreservation in teleosts

Los protocolos actuales para la crioconservación de semen de peces aún muestran muchas deficiencias para lograr óptimas tasas de fertilidad, observándose gran variación dentro y entre especies. Pocos eventos celulares y moleculares han sido descubiertos a partir de los resultados encontrados por los investigadores. Los procesos de formación de cristales de hielo a nivel intracelular, el efecto tóxico de los crioprotectores y la recristalización se muestran como los aspectos de mayor relevancia en el criodaño. Hipótesis como la transición de fasesde los lípidos en la membrana plasmática y la ruptura de la misma por el influjo rápido del agua, han sido propuestas para explicar el daño celular durante el proceso de crioconservación.